Rekombinantne DNA

Mis on rekombinantne DNA:

Rekombinantne DNA on DNA molekulid, millel on DNA fragmendid, mis on saadud kahest või enamast allikast, tavaliselt erinevatest liikidest.

Molekulaarne kloonimine on rekombinantse DNA metoodika keskne meetod ja see seisneb geeni ülekandmises ühest organismist teise, st DNA erinevatest allikatest rekombinatsiooni.

Rekombinantse DNA tehnoloogia

Protseduur hõlmab tavaliselt inimese potentsiaalse geeni (nt insuliini) isoleerimist ja selle geeni sisestamist looma-, bakteri- või pärmirakkudesse.

Restriktsiooniensüümidena kasutatavate valkude kasutamise teel eraldatakse inimese DNA üksikud geenid ja sisestatakse need sama ensüümiga lõigatud DNA väikesteks tükkideks, mida nimetatakse plasmiidideks .

Seejärel sisestatakse rekombinantne plasmiid loomade, bakterite või pärmi rakkudesse protsessis, mida nimetatakse transformatsiooniks .

Ravimi resistentsuse geenid, mis leiduvad samuti plasmiidis, valivad transformeerimata rakud transformeerimata.

Kloonimisprotsessi käigus luuakse rekombinantsete rakkude puhas populatsioon, kus valitud üksik rakk tekitab kloonide populatsiooni.

Protsessi lõpus eeldatakse, et kõik saadud rakud sisaldavad ühte koopiat plasmiidi, mis kannab sisestatud inimese geeni.

Kui geen ja kloonitud rakk on sisestatud, indutseeritakse rakud seejärel inimese geeni ekspresseerimiseks.

Rekombinantse DNA tehnoloogia rakendused

• Kasulike ainete, näiteks iniminsuliini, kasvuhormooni, vaktsiinide, tööstuslike ensüümide tootmine;
• Replikatsioon ja geeniekspressiooni mehhanismid;
• Isaduse uurimine;
• Geneetiliste ja nakkushaiguste diagnoosimine;
• Geeniteraapia;
• Transgeensed.

Lisateave valkude kohta.